灵芝孢子油抗移植性肉瘤实验报告
一、材料与方法
1.1 材料
1.1.1 中科牌灵芝孢子油软胶囊,批号20020925;南京中科生化技术有限公司提供。为橙黄色油状液体,加少量吐温-80充分研磨,并边研磨边加蒸馏水配制成所需浓度;氟脲嘧啶(5-Fu)南通制药厂生产批号020513,蒸馏水配制;以上均4℃保存备用。
1.1.2 KM小鼠雌雄各半,体重18-22g,由南京青龙山实验动物饲养中心提供,实验动物生产许可证号:SCXK(苏)2002-0018号。
1.1.3 小鼠移植性模型:实体型S180,由中国科学院上海研究所提供,本所动物房传代保种。
1.1.4 仪器设备:医用净化台YJ-1450S,苏州净化设备公司;BS110S电子天平,德国Sartorius。
1.2 方法
1.2.1 抗移植性实验方法:取健康、生长旺盛的S180荷瘤小鼠,颈椎脱臼处死,无菌条件下取出瘤块,制备成单细胞悬液,调节细胞浓度为1×108/ml,接种于健康小鼠右前肢下,每只0.2ml。接种24小时后随机分组,每组10只,分对照组(给予H2O),给药组(分别给予不同剂量的中科牌灵芝孢子油软胶囊)和阳性药对照组(5-Fu)并开始灌胃给药(ig),每日一次,连续8日。停药24小时后颈椎脱臼处死小鼠,称体重,解剖剥离瘤块,称瘤重,对照组平均瘤重1克以上可进行结果分析。按公式计算抑瘤率,t检验统计处理。抑瘤率≥30%以上判断为有一定的抗作用。
1.2.2 对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响:实验方法同1.2.1,停药24小时后处死小鼠,解剖取胸腺、脾脏、洗净吸干,称重,按公式计算脾指数、胸腺指数。
对照组平均瘤重-给药组平均瘤重
抑瘤率(%)= &灵芝的栽培技术 一、配制养料 ①杂木屑约75%,麦麸约25%,硫酸铵约0.2%,拌料含水量70%;②杂木屑约75%,麦麸约25%,拌料含水量60%;nbsp; ×100%
对照组平均瘤重
脾脏重量mg
脾指数(%)= ×100%
体重g
胸腺重量mg
另外,市场上销售的某些灵芝制剂系灵芝与茶叶的混可置菌种在清洁干燥、冷冻、低温、缺氧的环境中保存。现具体介绍以下几种方法:木屑保存菌种法 选用阔叶杂木屑78%、麦麸20%、白糖、石膏各1%,加适当的水调湿,分装试管,占试管的三分之四长,在1.2至1.5公斤每平方厘米高压下灭菌40分钟左右,合体,部分人有饮茶习惯。茶叶中含有咖啡因,能兴奋中枢,饮茶后尿量增加,过多夜尿影响。胸腺指数(%)= ×100%
体重g
二、结果
灵芝孢子油以300mg·kg-1,600 mg·kg-1和1200 mg·kg-1灌胃给药,对小鼠移植性肉瘤S-180的实验结果见表8-17。对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响见表8-18。
灵芝孢子油在本实验剂量范围内抑瘤率为48.06%-59.69%(P<0.05),有良好的抑瘤作用,其抑瘤作用呈良好的量效关系。可增加S-180荷瘤小鼠免疫器官重量,给药组脾指数、胸腺指数有所上升,提示其有刺激免疫功能作用。
表8-17 灵芝孢子油对小鼠移植性肉瘤S-180的抑制作用(n=10)
分组
剂量
mg·kg-1×d
给药途径
动物数
始/终
体重变化(g)
给药前/给药后
瘤重(g)
X±S
抑瘤率
%
H2O
孢子油
孢子油
孢子油
5-Fu
300×8
600×8
1200×8
25×8
ig
ig
ig
ig
ig
10/10
10/10
10/10
10/10
10/10
18.5/23.5
18.4/22.9
18.6/19.7
18.5/19.3
18.7/21.7
1.29±0.61
0.67±0.32*
0.56±0.29**
0.52±0.22**
0.67±0.21*
48.06
56.59
59.69
48.06
*P<0.05, ***P<0.01与对照组比
表8-18 灵芝孢子油对小鼠S-180肉瘤免疫器官重量的影响(n=10)
分组
剂量
mg·kg-1×d
给药
途径
动物数
始/终
脾指数
X±S
胸腺指数
X±S
H2O
孢子油
孢子油
孢子油
5-Fu
300×8
600×8
1200×8
25×8
ig
ig
ig
ig
ig
10/10
10/10
10/10
10/10
10/10
73.48±17.07
70.79±20.29
82.50±27.94
78.96±25.14
37.84±17.86
35.56±12.04
40.96±19.58
36.50±12.63
42.50±23.63
37.63±15.31
*P<0.05,**P<0.01与对照组比
结论:灵芝孢子油对Heps及S-180肉瘤都有明显抑制作用,其抑瘤作用呈良好的量效关系,并且对非特异性免疫功能有较强的增强作用。灵芝孢子油在方面具有很好的应用前景。
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本文关键词: 孢子
小鼠
灵芝
肉瘤
胸腺