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灵芝孢子油抗移植性肉瘤实验--江苏省肿瘤研究所顾奎星

灵芝孢子粉

  灵芝孢子油抗移植性肉瘤实验报告

  一、材料与方法

  1.1 材料

  1.1.1 中科牌灵芝孢子油软胶囊 ,批号20020925;南京中科生化技术有限公司提供 。为橙黄色油状液体 ,加少量吐温-80充分研磨,并边研磨边加蒸馏水配制成所需浓度;氟脲嘧啶(5-Fu)南通制药厂生产批号020513,蒸馏水配制;以上药物均4℃保存备用 。

  1.1.2 KM小鼠雌雄各半 ,体重18-22g,由南京青龙山实验动物饲养中心提供,实验动物生产许可证号:SCXK(苏)2002-0018号。

  1.1.3 小鼠移植性肿瘤模型:肝癌实体型S180 ,由中国科学院上海药物研究所提供,本所动物房传代保种。

  1.1.4 仪器设备:医用净化台YJ-1450S,苏州净化设备公司;BS110S电子天平 ,德国Sartorius 。

  1.2 方法

  1.2.1 抗移植性肿瘤实验方法:取健康 、肿瘤生长旺盛的S180荷瘤小鼠,颈椎脱臼处死,无菌条件下取出瘤块 ,制备成单细胞悬液,调节细胞浓度为1×108/ml,接种于健康小鼠右前肢下 ,每只0.2ml。接种24小时后随机分组 ,每组10只,分对照组(给予H2O),给药组(分别给予不同剂量的中科牌灵芝孢子油软胶囊)和阳性药对照组(5-Fu)并开始灌胃给药(ig) ,每日一次,连续8日。停药24小时后颈椎脱臼处死小鼠,称体重 ,解剖剥离瘤块,称瘤重,对照组平均瘤重1克以上可进行结果分析 。按公式计算抑瘤率 ,t检验统计处理。抑瘤率≥30%以上判断为有一定的抗癌作用。

  1.2.2 对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响:实验方法同1.2.1,停药24小时后处死小鼠,解剖取胸腺 、脾脏、洗净吸干 ,称重,按公式计算脾指数、胸腺指数 。

  对照组平均瘤重-给药组平均瘤重

  抑瘤率(%)= &灵芝的栽培技术 一 、配制养料  ①杂木屑约75%,麦麸约25% ,硫酸铵约0.2% ,拌料含水量70%;②杂木屑约75%,麦麸约25%,拌料含水量60%;nbsp; ×100%

  对照组平均瘤重

  脾脏重量mg

  脾指数(%)= ×100%

  体重g

  胸腺重量mg

  另外 ,市场上销售的某些灵芝制剂系灵芝与茶叶的混可置菌种在清洁干燥、冷冻、低温 、缺氧的环境中保存。现具体介绍以下几种方法:木屑保存菌种法 选用阔叶杂木屑78%、麦麸20%、白糖 、石膏各1%,加适当的水调湿,分装试管 ,占试管的三分之四长,在1.2至1.5公斤每平方厘米高压下灭菌40分钟左右,合体 ,部分人有饮茶习惯。茶叶中含有咖啡因,能兴奋中枢神经,饮茶后尿量增加 ,过多夜尿影响睡眠 。胸腺指数(%)= ×100%

  体重g

  二、结果

  灵芝孢子油以300mg·kg-1,600 mg·kg-1和1200 mg·kg-1灌胃给药,对小鼠移植性肉瘤S-180的实验结果见表8-17。对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响见表8-18。

  灵芝孢子油在本实验剂量范围内抑瘤率为48.06%-59.69%(P<0.05) ,有良好的抑瘤作用 ,其抑瘤作用呈良好的量效关系 。可增加S-180荷瘤小鼠免疫器官重量,给药组脾指数、胸腺指数有所上升,提示其有刺激免疫功能作用 。

  表8-17 灵芝孢子油对小鼠移植性肉瘤S-180的抑制作用(n=10)

  分组

  药物剂量

  mg·kg-1×d

  给药途径

  动物数

  始/终

  体重变化(g)

  给药前/给药后

  瘤重(g)

  X±S

  抑瘤率

  %

  H2O

  孢子油

  孢子油

  孢子油

  5-Fu

  300×8

  600×8

  1200×8

  25×8

  ig

  ig

  ig

  ig

  ig

  10/10

  10/10

  10/10

  10/10

  10/10

  18.5/23.5

  18.4/22.9

  18.6/19.7

  18.5/19.3

  18.7/21.7

  1.29±0.61

  0.67±0.32*

  0.56±0.29**

  0.52±0.22**

  0.67±0.21*

  48.06

  56.59

  59.69

  48.06

  *P<0.05, ***P<0.01与对照组比

  表8-18 灵芝孢子油对小鼠S-180肉瘤免疫器官重量的影响(n=10)

  分组

  药物剂量

  mg·kg-1×d

  给药

  途径

  动物数

  始/终

  脾指数

  X±S

  胸腺指数

  X±S

  H2O

  孢子油

  孢子油

  孢子油

  5-Fu

  300×8

  600×8

  1200×8

  25×8

  ig

  ig

  ig

  ig

  ig

  10/10

  10/10

  10/10

  10/10

  10/10

  73.48±17.07

  70.79±20.29

  82.50±27.94

  78.96±25.14

  37.84±17.86

  35.56±12.04

  40.96±19.58

  36.50±12.63

  42.50±23.63

  37.63±15.31

  *P<0.05 ,**P<0.01与对照组比

  结论:灵芝孢子油对Heps肝癌及S-180肉瘤都有明显抑制作用,其抑瘤作用呈良好的量效关系,并且对非特异性免疫功能有较强的增强作用。灵芝孢子油在肿瘤治疗方面具有很好的应用前景。

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  本文关键词: 孢子

  小鼠

  灵芝

  肉瘤

  胸腺

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